Konkretūs chlorofilo ekstrahavimo per ląstelių fragmentaciją naudojant ultragarsinį ląstelių smulkintuvą žingsniai

Ultragarsinis ląstelių trupintuvas naudoja ultragarso dispersijos poveikį skystyje, kad sukurtų kavitaciją, taip suardydamas skystyje esančias kietąsias daleles ar ląstelių audinius.
Vystantis biologinei pramonei išaugo reikalavimai eksperimentams naudojant ultragarsinius ląstelių pulverizatorius, pavyzdžiui, matuoti ir kontroliuoti mėginio temperatūrą, pagerinti žemos temperatūros aušinimo mėginių ir visos mašinos intelekto lygį ir pan.
Konkretūs chlorofilo ekstrahavimo ultragarsiniu ląstelių trupintuvu, naudojant ultragarsinį ląstelių trupintuvą, etapai:
1. Centrifuguokite arba filtruokite vandens mėginį ir ant įsiurbimo filtro uždėkite acetatinio pluošto filtro membraną. Supilkite kiekybinį vandens mėginio tūrį filtravimui, o neigiamas slėgis filtravimo metu neturi būti per didelis (apie 50 kPa). Paėmę vandens mėginį, toliau traukite 1-2 minutes, kad sumažintumėte drėgmę ant filtro membranos. Jei reikia trumpai laikyti 1-2 d., jį galima laikyti įprastame šaldytuve užšaldyti. Jei reikia ilgai laikyti (30 dienų), jį reikia laikyti žemos temperatūros šaldytuve (-20 laipsnis).
2. Išimkite filtro membraną su fitoplanktonu ir džiovinkite žemoje temperatūroje šaldytuve 6-8 valandas. Supjaustykite jį į mažus gabalėlius žirklėmis ir įdėkite į 5 ml arba 10 ml centrifugos mėgintuvėlį. Įpilkite 3-4 ml 90 % acetono, kad fragmentai būtų panardinti žemiau skysčio lygio. Įdėkite fragmentus į ultragarsinį indą ir ultragarso bangomis sulaužykite mėginio ląsteles. (Eksperimentų palyginimas skirtingais laikais ir dažniais, kad būtų lengviau nustatyti * suskaidymo laiką ir dažnį vieningiems metodams).
3. Centrifuguokite mėginį, kuris buvo suskaidytas ląstele, naudojant ultragarsą, naudojant centrifugą (3000-4000r/min) 10 minučių. Supernatantą supilkite į 5 ml arba 10 ml matavimo kolbą. Atskieskite iki 5 ml arba 10 ml 90% acetonu ir gerai suplakite.
4. Uždėkite supernatantą ant spektrofotometro ir naudokite 1 cm optinio kelio kolorimetrinį lėkštelę, kad nuskaitytumėte absorbcijos reikšmes atitinkamai 750 nm, 663 nm, 645 nm ir 630 nm bangos ilgiuose. Mėginio absorbcijai pakoreguoti naudokite 90 % acetoną kaip tuščiąjį absorbcijos matavimą.